基础医学与临床 ›› 2013, Vol. 33 ›› Issue (6): 694-698.

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PCBP2基因座位上长非编码RNA的筛选与鉴定

赵阿妮1,朱丽媛1,吴朝1,刘雪梅2,阴彬1,张靖3   

  1. 1. 中国医学科学院基础医学研究所 北京协和医学院基础学院
    2. 河北北方学院
    3. 中国医学科学院基础医学研究所&北京协和医学院 基础学院 生物化学与分子生物学
  • 收稿日期:2013-03-27 修回日期:2013-04-23 出版日期:2013-06-05 发布日期:2013-05-29
  • 通讯作者: 张靖 E-mail:Kinnzhang@gmail.com
  • 基金资助:
    自发性高血压大鼠心、脑、肾和肠系膜微动脉缝隙连接特性的比较研究》国家自然科学基金(国家自然科学基金)

Screening and identification of long noncoding RNAs in PCBP2 gene locus

  • Received:2013-03-27 Revised:2013-04-23 Online:2013-06-05 Published:2013-05-29
  • Contact: Jing ZHANG E-mail:Kinnzhang@gmail.com

摘要: 目的 从EST鉴定入手利用生物信息学方法筛选验证PCBP2基因内部UC.338基因座位附近的长非编码RNA。方法 首先利用生物信息学方法筛选包含内含子转录区域的ESTs,经CPC分析和统计学比较,共筛选到4个(人、鼠各两个)可能的lncRNAs,用PCR方法进行鉴定,克隆到pGEM-T载体测序验证,并用PCR, real-time PCR 的方法检测各ESTs在人源细胞系或小鼠不同组织,小鼠发育不同时间点大脑中的表达谱。结果 筛选到的4个ESTs中有3个ESTs 均具有一定的非编码特征,并最终测序正确:一个人源,两个鼠源,并且其中有些lncRNAs具有一定的细胞、组织特异性,有些lncRNAs具有广谱表达模式。结论 使用了一种新的寻找lncRNAs的方法,从EST鉴定入手,对现有数据库进行了挖掘。找到了可能在小鼠大脑发育过程中起作用的lncRNAs。

关键词: ESTs, 生物信息学分析, long nonconding RNA, 筛选, 鉴定, 表达谱分析

Abstract: Objective Screening and identification of long noncoding RNAs in PCBP2 gene locus based on ESTs. Methods Screening ESTs with introns transcription, with the analysis of CPC and statistical comparison, four ESTs were recognized as potential lncRNAs(two of the four are human ESTs, the other two are mouse ESTs), those ESTs were identified with polymerase chain reaction( PCR ) and then cloned in pGEM-T Vector-System for sequencing. We test the express of these ESTs in human cell lines or mouse tissue. Results The four ESTs are potential long noncoding RNAs, three out of four ESTs were identified, their expression were different. Conclusions With a new method for searching lncRNAs based on ESTs, we recognized some potential long noncoding RNAs, one of which may be a functional lncRNA influence mouse brain development.

Key words: ESTs, bioinformatic analysis, long noncoding RNA, screening, identification, expression

中图分类号: