摘要: 目的 构建尘螨变应原Der f2和Der p2嵌合基因文库,并进行生物信息学分析。方法 PCR分别扩增尘螨Ⅱ类变应原Der f2和Der p2基因,扩增产物等量混合后DNaseⅠ随机酶解;胶回收50bp-100bp之间的片段,连续进行3轮无引物PCR扩增,随后以Der f2基因的特异性引物进行有引物PCR扩增,扩增片段连接于pUCm-T载体,转化E. coli DH-5α后,随机挑取60个单菌落测序,应用DNAMAN软件进行序列比对分析和NetMHCII 2.2 Server软件进行辅助性T细胞(helper T cell)抗原表位的预测。结果 获得了10个基因片段发生明显交换的重组子,且生物信息学分析结果显示其编码蛋白不仅具有Der f2和Der p2所共有的Th细胞表位同时也出现了新的Th细胞表位。结论 成功应用DNA改组技术获得了Der f2和Der p2嵌合基因疫苗库,为后期筛选和制备高免疫原性和低变应原性的高效尘螨哮喘疫苗奠定了基础。