新型HER2 适配体的筛选及鉴定

基础医学与临床 ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (6): 608-612.

新型HER2 适配体的筛选及鉴定

刘喆¹,杨先达²

1. 中国医学科学院基础医学研究所
2. 中国医学科学院基础医学研究所

收稿日期:2012-03-19 修回日期:2012-04-25 出版日期:2012-06-05 发布日期:2012-05-25
通讯作者: 杨先达 E-mail:ayangmd@gmail.com
基金资助:
国家重大科学计划;骨髓间充质干细胞瘤化中STAT3信号通路过度激活的作用机制与规避研究

Identification of a novel DNA aptamer against HER2

Zhe Liu¹,Xian-da YANG

Received:2012-03-19 Revised:2012-04-25 Online:2012-06-05 Published:2012-05-25
Contact: Xian-da YANG E-mail:ayangmd@gmail.com

摘要/Abstract

摘要： 摘要：目的研发能特异性结合人表皮生长因子受体2（Human Epithelia Growth Factor Receptor2，HER2）的DNA适配体，为开发针对HER2的新型肿瘤靶向诊疗技术打下基础。方法体外合成全长86碱基并含有40个随机寡核苷酸的单链DNA文库，以HER2表位肽为靶标，利用指数富集的配体系统进化技术（Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment，SELEX），从单链DNA文库中筛选能够选择性结合HER2多肽的核酸适配体；流式细胞术检测富集进度、适配体与HER2蛋白及HER2阳性细胞的结合特性；Mfold软件预测二级结构。结果经多轮筛选获得了能够识别HER2多肽的DNA适配体HA5，其能够选择性地结合HER2蛋白及HER2阳性的乳腺癌细胞，而不结合胰酶和HER2阴性细胞。结论 DNA适配体HA5能选择性地识别HER2阳性的乳腺癌细胞，在研发针对HER2的新型肿瘤靶向诊疗技术方面具有应用潜能。

关键词: 适配体, SELEX, HER2, 乳腺癌

Abstract: Abstract: Objective To develop HER2 DNA aptamers that may potentially serve as tumor-binding ligand in novel HER2-targeted therapeutic strategies. Methods A single-stranded 86nt DNA library containing 40 random oligonucleotides was synthesized in vitro. A new aptamer HA5 were developed by SELEX technique with HER2 epitope peptide as target. Flow cytometry were performed to monitor the enrichment of aptamer pool and to evaluate the binding characterization of HA5. The structure of HA5 was performed by Mfold. Results The selected HA5 bound to the HER2 structure and had minimal cross reactivity to trypsin. In addition, the aptamer was found to preferentially bind to HER2-positive but not HER2-negative cells. Conclusion The results suggest that HA5 may have application potentials in targeted therapy against HER2-positive malignancies.

Key words: aptamer, SELEX, HER2, breast cancer

中图分类号:

R 979.1

刘喆杨先达. 新型HER2 适配体的筛选及鉴定[J]. 基础医学与临床, 2012, 32(6): 608-612.

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