摘要: 目的 探讨过表达miR-221对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y中N-MYC表达及其细胞增殖能力的影响。方法 构建miR-221过表达慢病毒载体并建立稳定转染细胞株,实验设未处理组、空载组和miR-221组,以实时定量荧光PCR(RT-qPCR)检测miR-221表达;以RT-qPCR和Western blot检测N-MYC mRNA及蛋白表达;流式细胞术检测细胞周期;CCK8法检测细胞增殖。结果 经测序证实慢病毒载体构建成功,与未处理的SH-SY5Y细胞相比,稳定表达miR-221的SH-SY5Y细胞(miR-221组)miR-221表达升高约7倍(P<0.01);miR-221组N-MYC mRNA和蛋白表达水平较未处理组显著增多(P<0.01);miR-221组G0/G1期细胞比例明显减少(P<0.05),S期细胞比例显著增多(P<0.05);miR-221组细胞增殖能力明显增强(P<0.01)。结论 过表达miR-221能够上调神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中N-MYC的表达,并可能通过促发细胞从G0/G1期向S期转化促进细胞增殖。
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