摘要: 目的 观察重组脂联素对肝细胞系L02基质金属蛋白酶-9表达及活性的影响,探讨脂联素在肝纤维化中的作用。方法 细胞分未转染对照组、转染空载体组、整合了adi-pEGFP-C1的L02细胞三组。体外扩增脂联素adiponectin mRNA全长,通过双酶切、插入及连接等基因克隆方法构建真核表达载体adi-pEGFP-C1。然后通过基因转染方法,将adi-pEGFP-C1转染到肝细胞系L02细胞中。通过G418压力筛选出adi-pEGFP-C1/L02稳定细胞系,用基因、蛋白以及蛋白酶谱等技术检测基质金属蛋白酶MMP-9的基因水平、蛋白水平以及酶的活性水平。结果 adi-pEGFP-C1构建成功,并成功筛选到L02稳定细胞系adi-pEGFP-C1/L02,与空白对照组相比,MMP-9 mRNA表达水平上调(P<0.01),MMP-9蛋白水平和活性均上调(P<0.05)。结论 脂联素通过调节MMP-9的表达及活性可能影响肝纤维化进程。
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