磁性纳米颗粒与脂质体介导REST-siRNA转染hADSCs的比较

基础医学与临床 ›› 2013, Vol. 33 ›› Issue (12): 1549-1553.

磁性纳米颗粒与脂质体介导REST-siRNA转染hADSCs的比较

王瑞¹,庞希宁¹,施萍²

1. 中国医科大学
2. 中国医科大学附属第一医院

收稿日期:2013-08-11 修回日期:2013-09-17 出版日期:2013-12-05 发布日期:2013-11-28
通讯作者: 庞希宁 E-mail:pangxining@126.com
基金资助:
国家重点基础研究发展规划;辽宁省科学技术计划;沈阳市科学技术计划

Comparison of magnetic iron oxide nanoparticles and lipofectamineTM 2000 connect REST-siRNA transfect human adipose mesenchymal stem cells

rui WANG, ,ping shi

Received:2013-08-11 Revised:2013-09-17 Online:2013-12-05 Published:2013-11-28

摘要/Abstract

摘要： 目的对聚乙烯亚胺包被的磁纳米颗粒 (PEI-SPIO) 与脂质体(lipofectamineTM 2000) 作为基因载体转染人脂肪间充质干细胞 (hADSCs) 的可行性及转染后细胞的增殖、转染效率及基因瞬时干扰效率进行比较分析。方法分别将 PEI-SPIO 和 lipofectamineTM 2000 作为基因载体连接 REST-siRNA 体外转染 hADSCs ，用 MTT 法检测hADSCs增殖和功能；用荧光显微镜观察转染效率；分别用 Real-time PCR 和 Western-blot检测 REST 的表达。结果用磁性纳米颗粒和脂质体作为基因载体转染细胞后，细胞成活率分别为 99%和79%(P<0.05) ；磁纳米颗粒和脂质体的转染效率无差异，分别为 75%和71% ；磁纳米颗粒和脂质体作为基因载体时RNA表达量分别为(0.46±0.04)和(0.53±0.05)，蛋白水平表达量分别为(0.501±0.006)和(0.523±0.004)。结论磁性纳米颗粒因其具有低细胞毒性可代替脂质体作为转染干细胞的基因载体。

关键词: 关键词：磁性纳米颗粒, 聚乙烯亚胺, 脂质体, 脂肪间充质干细胞, 转染

Abstract: Objective Comparison of polyethyleneimine package magnetic nanoparticles and lipofectamineTM 2000 in transfection of human adipose mesenchymal stem cells.And the feasibility, instantaneous interference efficiency and cell proliferation state, the transfection efficiency were compared. Methods The PEI-SPIO and lipofectamineTM 2000 connect REST-siRNA in vitro and transfect into human adipose mesenchymal stem cells, MTT method for determin the effects of human adipose mesenchymal stem cell proliferation and function. transfection efficiency was detected by fluorescence microscope.And REST changes were determined with Real-time PCR and Western-Blot. Results The survival rate of the PEI-SPIO method was 99% and the lipofectamineTM 2000 method was 79%(P<0.05); the transfection efficiency of PEI-SPIO was no difference, 75%和71% respectively, PEI-SPIO and lipofectamineTM 2000 as gene carrier at RNA level was (0.46±0.04) and (0.53±0.05) respectively,and at protein level was (0.501±0.006) and (0.523±0.004) respectively. Conclusion Magnetic nanoparticles because of its low toxicity can replace the lipofectamineTM 2000 transfect stem cells as a gene vector.

Key words: Key words: magnetic nanoparticles, polyethyleneimine, lipofectamineTM 2000 , human adipose mesenchymal stem cells, transfection

中图分类号:

R329.2+8

王瑞庞希宁施萍. 磁性纳米颗粒与脂质体介导REST-siRNA转染hADSCs的比较[J]. 基础医学与临床, 2013, 33(12): 1549-1553.

rui WANG ping shi. Comparison of magnetic iron oxide nanoparticles and lipofectamineTM 2000 connect REST-siRNA transfect human adipose mesenchymal stem cells[J]. Basic & Clinical Medicine, 2013, 33(12): 1549-1553.

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