基础医学与临床 ›› 2009, Vol. 29 ›› Issue (3): 229-233.
刘为青 董坚 赵德萍 洪敏 杨军 邢海霞
Wei-qing LIU, Jian DONG, De-ping ZHAO, Min HONG, Jun YANG, Hai-xia XING
摘要: 目的 探究乳腺癌特异性多肽携带外源生物分子进入特定肿瘤细胞的功能。方法 编码乳腺癌细胞特异性多肽(PⅠ)的序列插入质粒pGEX-2T,构建原核表达载体pGEX-2T-PⅠ,表达融合蛋白GST-PⅠ,亲和层析纯化,Western-blot鉴定。GST-PⅠ与人乳腺癌细胞MBA-MB-231体外共培养,免疫荧光检测PⅠ多肽携带GST蛋白的跨膜功能。结果 成功构建pGEX-2T-PⅠ原核表达载体,并在大肠杆菌中表达。融合蛋白占细菌总蛋白量的30%左右,纯化后蛋白纯度约为85%。免疫荧光检测显示GST-PⅠ能特异性进入MDA-MB-231细胞。结论 乳腺癌特异性多肽PⅠ能够介导融合蛋白GST-PⅠ穿过细胞膜进入MDA-MB-231细胞内。