摘要: 目的 观察突触核蛋白(α-synuclein, α-Syn)第129位丝氨酸(Ser129)磷酸化修饰对酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)活性的影响。方法 应用重叠延伸PCR定点突变法将129位丝氨酸编码碱基TCT突变为天冬氨酸(Asp,D)编码碱基GAT,获得编码模拟磷酸化α-Syn (S129D α-Syn)的DNA序列,插入逆转录病毒真核表达载体(pLNCX2)。包装逆转录病毒颗粒并感染多巴胺能神经细胞MN9D。通过实时定量RT-PCR鉴定α-Syn基因表达,Western blot检测TH磷酸化水平。结果 pLNCX2-α-Syn (wild type/S129D) 质粒测序结果正确,并在MN9D细胞中均过表达。野生型α-Syn过表达组同正常对照组相比TH磷酸化水平降低(p<0.01),而S129D α-Syn组TH的磷酸化水平同正常对照组相比明显升高(p<0.05)。结论 在MN9D细胞中,野生型α-Syn 抑制TH的活性,而α-Syn Ser129 磷酸化后TH活性明显升高。