摘要: 目的 探讨不同的标本处理和储存条件对蛋白指纹图谱技术检测血清多肽及低分子量蛋白质(1-30 kDa)的影响。方法 将血液凝固后马上分离得到的血清分装后分别置于-80℃六个月以上以及室温、4℃条件下2小时至72小时进行蛋白质质谱分析。同时观察溶血,反复冻溶,将血清用U9缓冲液稀释后保存1天至7天的血清蛋白质质谱变化。结果 不同的样本处理及储存条件,对蛋白质谱分析影响不同。血清样本在-80℃六个月以上以及4℃或者25℃保存2小时或者反复冻溶1次,对多肽及低分子量蛋白质(1-30 kDa)的影响相对较小,分别只有1.9%-2.9%的峰值CV > 20%。然而,血清样本在4℃或者25℃保存至72小时后,分别有12.6%-15.5%的峰有显著性差异(CV > 30%)。将血清用U9缓冲液稀释后放置于室温,在24小时内结果稳定。至48小时,有6.8%的峰CV > 30%。溶血会对蛋白质组的结果造成很大影响,经统计学分析35.9%的峰有显著性差异(p < 0.01)。结论 血清中多肽及低分子量蛋白质组会受到样本处理和储存过程的影响。为了使蛋白质组的结果有可比性,更有助于生物标志物的发现,有必要对血清样本处理以及储存过程引起高度重视,进行标准化操作。建议血液标本的处理、运送、操作及储存的蛋白质质谱分析的标准条件是:4℃下处理血液标本,2小时内尽快分离血清及细胞。用U9缓冲液稀释血清后,可以24小时内在室温下运送或对血清及WCX磁珠结合过程进行操作。血清应分装并长期储存在-80℃,但限冻溶1次。对溶血标本,应重新取血。