摘要: 摘要:目的 制备人rBPI23,免疫家兔获得特异性多克隆抗体,为制备单克隆抗体及后期建立BPI免疫学检测方法奠定基础。方法 将PBV220-synBPI600表达载体转化感受态E.coli DH5α,温控诱导后,获得以包涵体形式表达的目的重组蛋白;用SDS-PAGE鉴定分子量,Western-blot鉴定抗原性;免疫家兔获得rBPI23抗血清,经饱和硫酸铵沉淀获得多克隆抗体,间接法ELISA检测抗体效价,Western-blot分析抗体的特异性。结果 重组蛋白主要以包涵体形式表达,SDS-PAGE显示其分子量约23KD,与预期结果相符;Western-blot结果显示重组蛋白能与市售兔抗人BPI抗体特异性结合;免疫家兔获得高效价(1:320000)抗血清,Western-blot证实上述抗体能与rBPI23及人BPI标准品特异性结合。结论 成功制备了人rBPI23,免疫家兔获得高效价抗人rBPI23多克隆抗体。