论著
于喜乐, 卫爱武, 赵哲琪, 崔天薇, 石少琦
目的 探究丹寿汤调节脂肪合成酶(fat synthase,Fas)/脂肪合成酶配体(fat synthase ligand,FasL)信号通路对复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)大鼠子宫蜕膜组织细胞凋亡的影响。方法 米菲司酮片建立RSA模型,将模型组随机分为模型组、丹寿汤低剂量组、丹寿汤高剂量组、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)组、Fas组,每组各6只。其中丹寿汤低、高剂量组分别每天灌胃5.6、11.2 g·kg-1的丹寿汤,持续灌胃9 d;IgG组、Fas组在灌胃11.2 g·kg-1的丹寿汤的基础上分别注射0.2 mL的IgG抗体(1 mg·mL-1)、0.2 mL的Fas抗体(5 μg·mL-1)。选取同批正常受孕的6只大鼠作为对照组,灌胃等量的生理盐水。酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分析各组大鼠肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,gM-CSF)的水平,实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测子宫蜕膜组织Fas、FasL mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测Fas、FasL及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 Associated X protein,Bax)、半胱天冬蛋白酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)、Cleaved-caspase-3蛋白表达,TUNEL检测子宫蜕膜组织细胞凋亡。结果 相比于对照组,模型组胚胎吸收率、TNF-α、IL-6、gM-CSF水平,Fas、FasL mRNA和蛋白、Bax、Caspase-3、Cleaved-caspase-3蛋白表达、细胞凋亡率显著升高,胚胎质量、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05);相比于模型组,丹寿汤低、高剂量组胚胎吸收率、TNF-α、IL-6、gM-CSF水平,Fas、FasL mRNA和蛋白、Bax、Caspase-3、Cleaved-caspase-3蛋白表达、细胞凋亡率依次降低,胚胎质量、Bcl-2蛋白表达依次升高(P<0.05);相比于丹寿汤高剂量组和IgG组,Fas组胚胎吸收率、TNF-α、IL-6、gM-CSF水平,Fas、FasL mRNA和蛋白、Bax、Caspase-3、Cleaved-caspase-3蛋白表达、细胞凋亡率显著升高,胚胎质量、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论 丹寿汤处理可能通过抑制Fas/FasL通路,调控凋亡相关蛋白表达,并抑制炎症反应,进而抑制RSA大鼠子宫蜕膜组织细胞凋亡。
