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• 2014年, 49卷, 第13期
  刊出日期：2014-07-15

    

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  综述
  论著
  药物与临床
  学术讨论
  

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综述
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  综述

  硫酸软骨素的药理作用及应用研究进展

  肖玉良^，，李平利，程艳娜，张新科，王凤山^*

  2014, 49(13): 1093-1098. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.001

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  目的 综述近年来硫酸软骨素的药理作用及应用研究进展。方法 根据国内外相关文献，对硫酸软骨素的药理作用及应用进行整理与总结。结果与结论 硫酸软骨素具有抗炎、免疫调节、心脑血管保护、神经保护、抗氧化、细胞黏附调节、抗肿瘤等多种药理学活性，目前临床上主要用于骨关节炎、心脑血管疾病及眼科疾病的预防和治疗，且长期服用毒副作用小，是很有开发潜力的药物。
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  综述

  肝脏转运体介导的与口服降糖药相关药物相互作用研究进展

  张帆，魏玉辉，李波霞，武新安^*

  2014, 49(13): 1099-1103. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.002

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  目的 综述肝脏转运体介导的与口服降糖药相关的药物相互作用。方法 通过查找近10年相关文献资料对肝脏转运体介导的与口服降糖药相关的药物相互作用进行总结阐述。结果 口服降糖药是治疗2型糖尿病的首选药物，糖尿病患者在服用口服降糖药的同时常服用其他多种药物治疗相关疾病，这使药物相互作用发生的概率升高。多数口服降糖药在体内需经过肝脏，肝脏中除含有丰富的代谢酶外还含有多种转运体，当口服降糖药与合用药物分享相同肝脏转运体时，药物相互作用发生概率升高，是引起与口服降糖药相关的药物相互作用的重要因素之一。结论 肝脏转运蛋白介导的与口服降糖药相关的药物相互作用是普遍存在的，为了减少糖尿病患者因同时服用多种药物而产生的不良反应，促进临床合理用药，有必要对肝脏转运体介导的与口服降糖药相关的药物相互作用进行深入研究。
论著
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  论著

  人参皂苷Re人工抗原的合成及单克隆细胞株的筛选

  赛佳洋^a，c，屈会化^b，c，冯会宾^c，d，孔慧^a，c，王艳^a，c，王雪茜^a，c，赵琰^a，c*，王庆国^a，c*

  2014, 49(13): 1104-1108. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.003

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  目的 合成并鉴定人参皂苷Re(GRe)人工抗原，用于单克隆抗体的制备。方法 采用高碘酸钠氧化法合成人参皂苷Re人工免疫抗原(GRe-BSA)和人工包被原(GRe-OVA);利用薄层色谱法及紫外光谱法鉴定人参皂苷Re人工免疫抗原和人参皂苷Re人工包被原;利用人参皂苷Re人工免疫抗原多次免疫BALB/c小鼠后，通过间接ELISA法测定免疫小鼠抗血清的效价和特异性。采用PEG法诱导小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合，有限稀释法进行单克隆细胞株的筛选。结果 紫外光谱和薄层色谱法检测结果表明，人参皂苷Re与BSA/OVA偶联成功;小鼠抗血清效价大于1∶60 000，竞争抑制曲线表明，血清中的抗人参皂苷Re抗体可与人参皂苷Re产生特异性结合。有限稀释法筛选出能分泌抗人参皂苷Re抗体的单克隆细胞株2F4-3H10。结论 成功合成了人参皂苷Re人工免疫抗原和人参皂苷Re人工包被原，并可诱发小鼠产生相应特异性抗体;筛选出了人参皂苷Re单克隆细胞株，可用于腹水的大量制备及免疫组化技术的建立。
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  论著

  新疆赤芍抗血小板聚集作用及其不同组分分析

  热娜·卡斯木，王慧，王晓梅，胡君萍，王小青，樊珍珍，王金辉

  2014, 49(13): 1109-1112. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.004

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  目的 建立新疆赤芍组分库，探讨药材组分的分离与表征方法。方法 选取新疆赤芍为研究对象，利用抗血小板聚集模型对其组分进行活性初步筛选。将各组分HPLC分析图与其活性研究结果相结合，观察已确认有活性的化合物是否是组分产生活性的物质基础。结果 乙酸乙酯组分(CS-EA)活性显著，其中活性最强的组分为其第二部分(EA-2)(P<0.01)，共指认出新疆赤芍中的4种化合物(没食子酸、儿茶素、芍药苷、丹皮酚)。结论 利用HPLC，获取乙酸乙酯组分的化学指纹图谱，并结合活性实验结果对组分进行初步表征。
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  论著

  细梗香草总皂苷壳聚糖絮凝纯化工艺研究

  高帅^，，李凌军，栾明^，，徐婵娟，李锡敏，于秀颖，张琳^*

  2014, 49(13): 1113-1117. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.005

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  目的 研究细梗香草总皂苷壳聚糖絮凝纯化工艺，为继续纯化三萜皂苷B(LC-B)和三萜皂苷C(LC-C)奠定基础。方法 用可见分光光度法、高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)，分别测定总皂苷中间体水溶液絮凝率、总皂苷损失率，以絮凝率和总皂苷损失率为指标，用正交实验优选壳聚糖絮凝纯化最佳工艺条件。结果 最佳工艺条件为总皂苷质量浓度为0.6 mg·mL^-1， 每100 mL总皂苷水溶液加入壳聚糖溶液30 mL，絮凝温度60 ℃，絮凝时间4 h。验证结果表明，总皂苷中间体水溶液澄清率为47.81%，总皂苷损失率为9.53%。结论 与传统除鞣质工艺相比，壳聚糖絮凝纯化工艺能有效保留有效成分，工艺稳定性好，适合工业化生产。
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  论著

  促进沉香形成真菌ASAF05的分离、筛选和鉴定

  陈旭玉^，，杨云^，，刘洋洋，魏建和^，*，张争^，，甘炳春

  2014, 49(13): 1118-1120. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.006

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  目的 为了获得促进白木香(Aquilaria sinensis)高效形成沉香的真菌，本实验对白木香中的真菌进行分离、筛选及鉴定。方法 采用PDA培养基分离并纯化菌株，真菌菌液接种到白木香树进行功能验证，通过形态学特征结合ITS序列分析进行真菌鉴定。结果 分离到1株真菌ASAF05，其菌液输到白木香6个月后能促进沉香的形成。ASAF05鉴定为条纹拟盘多毛孢(Pestalotiopsis virgatula)，属于拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis)，黑盘孢科(Melanconiaceae)，黑盘孢目(Melanconiales)，腔胞纲(Coelomycetes)，半知菌亚门(Deuteromycotina)。结论 首次报道条纹拟盘多毛孢(P. virgatula)能促进白木香结香。
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  论著

  黄管秦艽中总裂环烯醚萜苷对白细胞介素-1β诱导下大鼠软骨细胞的影响

  李希斌，叶娟，赵磊^*，夏鹏飞，彭雪晶，余晓晖

  2014, 49(13): 1121-1125. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.007

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  目的 通过考查甘肃习用药材黄管秦艽栽培种和野生种中总裂环烯醚萜苷对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的大鼠软骨细胞的影响，探讨栽培种和野生种黄管秦艽中总裂环烯醚萜苷治疗骨关节炎(osteoarthritis，OA)的可行性。方法 取大鼠关节软骨细胞第4代，将第4代软骨细胞分为4组 :空白组(A组)软骨细胞用完全培养基培养;白细胞介素-1β诱导组(B组)软骨细胞以10 ng·mL^-1重组大鼠白细胞介素-1β培养24 h;白细胞介素-1β和栽培种黄管秦艽总裂环烯醚萜苷组(C组:分为C1组50 μg·mL^-1; C2组200 μg·mL^-1; C3组400 μg·mL^-1)软骨细胞以10 ng·mL^-1重组大鼠白细胞介素-1β和栽培种黄管秦艽总裂环烯醚萜苷(以下称栽培组)培养24 h;白细胞介素-1β和野生种黄管秦艽总裂环烯醚萜苷组(D组:分为D1组50 μg·mL^-1;D2组100 μg·mL^-1; D3组200 μg·mL^-1)软骨细胞以10 ng·mL^-1重组大鼠白细胞介素-1β和野生种黄管秦艽总裂环烯醚萜苷(以下称野生组)培养24 h。培养后取各组细胞进行免疫细胞化学染色，收集细胞培养液，检测其上清液中表达前列腺素E₂的情况。结果 四甲基偶氮唑蓝法结果显示，栽培组(50、200、400 μg·mL^-1)对软骨细胞作用24 h时无毒性作用，野生组(50、100、200 μg·mL^-1)对软骨细胞作用24 h时无毒性作用。免疫细胞化学染色显示，栽培组和野生组与诱导组相比Ⅱ型胶原阳性表达明显增强，但弱于空白组，并且随着质量浓度的增大Ⅱ型胶原阳性表达逐渐增强，差异有统计学意义(P<0.05)。酶联免疫法结果显示，栽培组和野生组与诱导组相比前列腺素E₂含量明显降低，但高于空白组，并且随着质量浓度的增大前列腺素E₂含量越低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 栽培种和野生种黄管秦艽中的总裂环烯醚萜苷均对炎症软骨细胞具有一定的保护作用。
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  论著

  川芎嗪通过抑制RAGE-ERK1/2-p38-NFκB信号通路及活性氧生成改善阿尔茨海默病大鼠脑组织炎性

  刘长安，朱洁，蔡标，黄金玲^，

  2014, 49(13): 1126-1132. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.008

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  目的 观察川芎嗪对阿尔茨海默病大鼠脑组织炎性及原代海马神经元的RAGE-ERK1/2-p38-NFκB信号转导系统的影响。方法 采用Aβ_25-35双侧海马注射建立阿尔茨海默病大鼠模型，观察川芎嗪对阿尔茨海默病大鼠海马组织RAGE蛋白表达及脑组织炎症因子水平;原代培养大鼠海马神经元细胞，并转染大鼠RAGE基因过表达载体，加入Aβ_25-35建立体外细胞模型，四甲基偶氮唑蓝法检测细胞活性，DCFH-DA荧光染料检测活性氧，Real-time qPCR检测RAGE mRNA表达，Western blot检测ERK1/2、p38、IκB磷酸化水平。结果 川芎嗪可显著性降低阿尔茨海默病大鼠海马组织RAGE蛋白表达，显著降低脑组织炎症因子白细胞介素-1β、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α水平;川芎嗪可显著提高原代海马神经元细胞存活，显著抑制活性氧生成，降低RAGE mRNA水平，显著降低ERK1/2、p38、IκB的磷酸化水平。当海马神经元过表达RAGE后，川芎嗪的相关作用可以被逆转。结论 川芎嗪通过对阿尔茨海默病大鼠海马神经元RAGE-ERK1/2-p38-NF-κB信号通路的下调作用，有效抑制神经元活性氧生成，降低Aβ的神经毒性，改善阿尔茨海默病大鼠脑组织炎性，进而发挥其抗阿尔茨海默病及神经保护作用。
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  论著

  计算机模拟筛选雷公藤内酯醇治疗银屑病的靶标蛋白

  李家璜，胡桉，郑伟娟^*，华子春^*

  2014, 49(13): 1133-1138. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.010

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  目的 应用虚拟筛选方法预测雷公藤内酯醇作用靶标， 以期阐明雷公藤治疗银屑病机制。方法 根据银屑病的病理学特征，从PDTD(Potential Drug Target Database)数据库中筛选到的一批与雷公藤内酯醇可能发生相互作用的蛋白质中，选取视黄酸结合蛋白2、Caspase-1、蛋白S100-A9、视黄酸受体-alpha、视黄酸受体-beta、视黄酸受体-gamma、VEGFR以及血管生成素-1受体等8种可能与银屑病治疗相关的蛋白质靶标，利用Autodock 4.2分子对接软件，对雷公藤内酯醇与上述蛋白质靶标进行了逐一的精细对接和分析。 结果 通过比较其结合自由能、预测其抑制常数，并分析雷公藤内酯醇与蛋白质靶标的相互作用，发现雷公藤内酯醇与视黄酸结合类蛋白的相互作用最为强烈。结论 雷公藤内酯醇治疗银屑病的药理学机制可能与视黄酸相关信号通路有关，我们的研究为进一步的药理学机制研究奠定了基础.
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  论著

  介孔二氧化硅制备尼莫地平纳米固体分散体

  王天怡，赵勤富，韩旭，姜同英，王思玲，汪冰^*

  2014, 49(13): 1139-1145. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.011

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  目的 制备尼莫地平(NMP)/介孔二氧化硅纳米固体分散体，以期通过提高尼莫地平的溶出速率，改善尼莫地平的生物利用度。方法 采用软模板法分别制备2种介孔二氧化硅SBA-16和SBA-15，对其进行表征，采用熔融法和溶剂法分别制备尼莫地平/二氧化硅固体分散体，以氮吸附曲线，扫描电镜，X-射线衍射及差示扫描量热法对载药与载药体系进行表征，并对自制固体分散体的溶出速率与大鼠体内药动学进行研究。结果 SBA-16为规则的球形形貌，比表面积为775.8 m²·g^-1，总孔体积为0.7 cm³·g^-1。SBA-15为棒状结构，比表面积为449.1 m²·g^-1，总孔体积为1.02 cm³·g^-1;当载体与药物的投料比为3∶1以上时，药物以非晶型形式吸附于载体表面及载体孔道中;自制固体分散体给予大鼠ig后与进口市售制剂尼膜同相比，溶出度与生物利用度均有所提高。结论 介孔二氧化硅适用于尼莫地平纳米固体分散体的制备，所制纳米粒具有提高生物利用度的作用。
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  论著

  黏液层对不同季铵化度的三甲基壳聚糖口服纳米粒的影响

  郭晗，龚涛，黄园^*

  2014, 49(13): 1146-1151. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.012

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  目的 研究不同季铵化度(DQ)对三甲基壳聚糖(TMC)载胰岛素纳米粒性质及细胞摄取、跨膜转运的影响，并考察黏液对其作用，为口服纳米粒研究提供参考。方法 采用离子交联法制备不同季铵化度三甲基壳聚糖纳米粒，以黏液分泌型HT29-MTX-E12(E12)细胞为模型研究在有无黏液存在的情况下纳米粒的细胞摄取与转运情况。结果 季铵化度越高，三甲基壳聚糖纳米粒稳定性、细胞摄取及跨膜转运率越高，并且黏液对高季铵化度的三甲基壳聚糖纳米粒表现出阻碍作用，对低季铵化度的三甲基壳聚糖纳米粒表现为一定的促进作用。结论 季铵化度是影响三甲基壳聚糖纳米粒性质的关键因素，在设计口服纳米粒时要综合考虑其穿黏液性质和跨肠上皮细胞的能力。
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  论著

  非洛地平纳米混悬液固化方法的考察

  杜郁茜，李艳，魏巍，付强，何仲贵，孙进^，*

  2014, 49(13): 1152-1155. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.013

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  目的 非洛地平纳米混悬液存在物理不稳定性，本实验旨在采用固化方法提高其物理稳定性。 方法 分别采用絮凝法和冷冻干燥法对非洛地平纳米混悬液进行固化。结果 非洛地平纳米混悬液的平均粒径为151 nm，呈单峰分布。絮凝后仅有76.7% 小于1 μm，且呈三峰分布;以20%甘露醇-甘氨酸 (1∶1，W/W)组对混悬剂的保护作用冻干效果最好，平均粒径在375 nm左右的粒子占80%左右，其余粒径更小。结论 选择冷冻干燥法固化非洛地平纳米混悬液，并且采用20%的甘露醇-甘氨酸 (1∶1，W/W)溶液为保护剂时，冻干效果最好。
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  论著

  新疆维吾尔族、汉族人群TNF-α基因多态性与分泌量的相关性研究

  陈卫军，智勇刚，姜晓瑞，吴志远，李国昌^*

  2014, 49(13): 1156-1160. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.014

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  目的 探讨肿瘤坏死因子-α-1031C/T、-863A/C、-857C/T、-308A/G位点基因多态性在汉族和维吾尔族间的差异及与肿瘤坏死因子-α分泌量的关联。方法 采用聚合酶链反应及直接基因测序法比较121汉族与 126维吾尔族健康人群基因型、等位基因频率和单倍体频率的差异。ELISA法测定两民族人群血清肿瘤坏死因子-α分泌水平。结果 肿瘤坏死因子-α基因-1031C/T位点CC、CT、TT基因型频率分别为汉族(4.96%，35.54%，59.50%)，维吾尔族(3.17%，27.78%，69.05%);-863A/C位点AA、AC、CC基因型频率分别为汉族(4.13%，28.93%，66.94%)，维吾尔族(0.79%，23.02%，76.19%); -857C/T位点CT、TT、CC基因型频率分别为汉族(26.45%，0.00%， 73.55%)，维吾尔族(27.78%，2.38%，69.84%);-308A/G位点 AA、AG、GG 基因型频率分别为汉族(0.83%，9.09%， 90.08%)，维吾尔族(2.38%，17.46%，80.16%);连锁单倍体TCCA为高分泌型，CCCA为低分泌型。结论 血清肿瘤坏死因子-α的分泌水平在两民族间存在差异并受连锁单倍体影响;肿瘤坏死因子-α-308A/G位点基因型频率和等位基因频率在汉族和维吾尔族人群间的分布均有显著性差异，提示新疆维吾尔族人群基因分布与汉族人群不同的特点。
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  论著

  黄连及黄连解毒汤水煎剂的稳定性实验研究

  郑金凤，夏坤，李国辉^*

  2014, 49(13): 1161-1164. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.015

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  目的 研究单方黄连和黄连解毒汤水煎剂的稳定性。方法 采用高效液相色谱法测定黄连水煎液(常压煎药机组和手工煎煮组)中指标性成分盐酸小檗碱，黄连解毒汤(常压煎药机组和手工煎煮组)中指标性成分栀子苷、黄芩苷、盐酸小檗碱，在4 ℃的冰箱中放置1、3、5、7、10、14、21、28 d后的含量。结果 单方黄连水煎液在放置28 d后盐酸小檗碱的含量(常压煎药机组)在0.066 9～0.065 5 mg·mL^-1之间，(手工煎煮组)在0.063 5～0.064 4 mg·mL^-1之间;黄连解毒汤(常压煎药机组和手工煎煮组)中栀子苷的含量分别为在0.296 6～0.285 7 mg·mL^-1之间，0.275 0～0.261 2 mg·mL^-1之间，黄芩苷的含量0.275 7～0.199 0 mg·mL^-1之间，0.219 4～0.162 4 mg·mL^-1之间，盐酸小檗碱的含量在0.026 2～0.005 0 mg·mL^-1之间，0.014 0～0.005 8 mg·mL^-1之间。pH值测定结果，黄连水煎液和黄连解毒汤均未出现明显变化。结论 放置28 d后，单方黄连水煎液中的盐酸小檗碱的含量基本不变，黄连解毒汤中的栀子苷含量变化不大，黄芩苷和盐酸小檗碱含量随放置时间的延长均有明显下降趋势。
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  论著

  手性高效液相色谱法测定盐酸替罗非班光学异构体

  吴燕，林向阳，张福成^*

  2014, 49(13): 1165-1167. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.016

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  目的 建立测定盐酸替罗非班光学异构体的高效液相色谱方法。方法 采用ULTRON ES-OVM(4.6 mm×150 mm，5 μm)手性柱，以8%(m/m)醋酸铵缓冲液(pH 5.0)-40%(V∶V)的甲醇乙腈溶液(95∶5)为流动相，流速0.8 mL·min^-1，柱温30 ℃，检测波长227 nm。结果 盐酸替罗非班光学异构体在0.4~10 μg·mL^-1内均呈良好的线性关系，检测限为2 ng，定量限为6 ng，平均加样回收率为99.8%，与其D-对映体的分离度为2.1。结论 本方法简便、准确、灵敏，专属性强，适用于盐酸替罗非班光学异构体的测定。
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  论著

  有色注射剂和乳状注射剂溶血与凝血检查法研究

  刘倩，张媛，陈晨，贺庆，钱德明，刘群丽，高华^*

  2014, 49(13): 1168-1171. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.017

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  目的 补充和完善《中国药典》2010年版中溶血与凝聚实验方法，排除有色注射剂和乳状注射液对溶血检查的干扰。方法 方法一是增加显微镜观察和血球计数仪检测，与现有肉眼观察方法进行。方法二是将温育的血细胞离心后取上清液在紫外分光光度计上，波长545 nm处比色，计算溶血阳性率。结果 利用血球计数仪计数红细胞得出的溶血阳性率结果与肉眼观察存在一定的差异，镜下观察红细胞数量和形态与肉眼观察具有一致性和相关性。有色供试品溶液溶血检查比色法所得结果的溶血阳性率明显高于传统的肉眼观察法。结论 利用显微镜下观察红细胞数量和形态的方法有助于进一步准确判断溶血与否，可以考虑纳入药典作为一些特殊品种溶血的检测方法，以排除有色注射剂和乳状注射液品种对溶血检查的干扰。比色法还需要进一步研究。
药物与临床
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  药物与临床

  我院帕瑞昔布用于围手术期镇痛的使用情况分析

  陈頔，刘策时，钱璐璐，刘治军^*，孙春华

  2014, 49(13): 1172-1175. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.018

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  目的 分析我院帕瑞昔布用于围手术期镇痛的使用情况。方法 采用回顾性调查方法，对我院100例普外科、骨科和妇科围手术期使用帕瑞昔布患者的镇痛药物使用情况进行分析。结果 100例患者中，普外科、骨科和妇科的比例分别为7%、93%和0。术前镇痛药物的使用比例15%，且只有5例联合使用镇痛药物。术中和术后联合应用镇痛药物患者分别为61和38例。帕瑞昔布在术前主要用于原发疾病的治疗;术中帕瑞昔布与阿片类药物联合应用的患者有59例;术后单独使用帕瑞昔布的患者为62例、与阿片类联合应用为13例、与非阿片类联合应用为25例。患者术后使用术后自控镇痛(PCA)泵的比例为69%，PCA给药均为静脉途径，品种主要为吗啡注射液。术后镇痛药物不良反应的发生率是4%。结论 我院帕瑞昔布主要用于骨科手术的围手术期疼痛治疗，术中多与阿片类注射剂联合应用，术后则多为单独使用。
学术讨论
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  学术讨论

  生物样品定量分析方法验证中试验样品再分析的意义和对策

  陈笑艳^，，詹燕，钟大放^，*

  2014, 49(13): 1176-1180. https://doi.org/10.11669/cpj.2014.13.020

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  目的 介绍试验样品再分析(incurred sample reanalysis， ISR)的法规要求、意义和对策。方法 综述国际上关于试验样品再分析的指导原则、研究论文和统计数据，通过实例来总结试验样品再分析失败的原因及预防措施。结果与结论 试验样品再分析有助于改善生物分析方法的重现性，已经成为法规生物样品分析的一项重要内容。采取适当的对策，可以防止试验样品再分析失败造成的损失。