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  • 2020年, 55卷, 第11期
    刊出日期:2020-06-08
      

    综述
    论著
  • 全选
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    综述
  • 综述
    杨文盛, 张军东, 刘璐, 韩华
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    在生物医学和药物的研究与开发领域,蛋白质的提取、分离与纯化技术扮演重要的角色,而近年来对蛋白质的研究也取得了一些极具意义的进展,对蛋白质的各种特性有了新的认知。同时,物理、化学及工程技术领域的发展也推动了提取分离方法学的不断改进与提高。由此,笔者就蛋白质的产品来源与分类,对蛋白质的提取、分离和纯化技术方法进行了综述,并对其未来的发展进行展望。
  • 综述
    向涛, 罗永祥, 徐铭
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    在目前临床用药中,由于患者基因型背景多样性,无法确认患者对相应抗癌药物的敏感性,对药物的副作用和耐药问题也缺乏对策。近年来,高通量技术的发展使得在癌细胞系中大规模筛选化疗药物成为可能,同时产生了大量组学数据。目前,基于这些数据已建立了多种关于抗癌药物的预测模型,这些研究将有助于对癌症病人药物治疗的靶点进行预测和优化。笔者就抗癌药物预测模型的研究进展进行综述。
  • 综述
    张铭予, 李春雨, 李国辉
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    肺癌是所有恶性肿瘤中发病率和死亡率最高的癌种,而肺癌转移是导致癌症患者死亡的主要原因。肺癌转移是一个复杂的过程,大量研究证实,肺癌组织可分泌可溶性分子,调动并募集相关骨髓细胞或免疫细胞,调控远端靶器官基质重塑并形成肺癌转移前微环境,进而促进肿瘤细胞转移并种植于远端靶器官中。此过程中涉及的关键靶点因子的检测对于临床肿瘤诊断和预后评估具有重要临床意义。笔者将从转移前微环境调控肺癌转移的发生发展进程以及临床应用现状加以综述。
  • 论著
  • 论著
    吴钰颖, 金琳, 马永军, 王开玲, 李海峰
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    目的 探讨大理不同产地多叶重楼和云南重楼根茎HPLC指纹图谱及7种主要甾体皂苷成分差异。方法 采用高效液相色谱法建立大理不同产地多叶重楼和云南重楼根茎HPLC指纹图谱,并对指纹图谱相似度及7种主要甾体皂苷成分进行比较分析。结果 大理不同产地多叶重楼根茎HPLC指纹图谱有14个共有峰,除巍山金华、巍山龙街外其他产地多叶重楼根茎HPLC指纹图谱相似度均大于0.9;大理不同产地云南重楼根茎HPLC指纹图谱有13个共有峰,大理不同产地云南重楼根茎HPLC指纹图谱相似度均大于0.92;大理不同产地多叶重楼和云南重楼根茎HPLC指纹图谱有11个共有峰,大理不同产地多叶重楼和云南重楼根茎HPLC指纹图谱相似度极低,相似度仅在0.057~0.225之间。大理不同产地多叶重楼和云南重楼根茎中均检测到重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ和重楼皂苷Ⅶ,大理不同产地云南重楼根茎中重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ和重楼皂苷Ⅶ的峰面积均值高于多叶重楼,在南涧乐秋、巍山金华、洱源凤羽、洱源邓川、弥渡红岩、鹤庆西邑多叶重楼和大理湾桥、大理凤仪、鹤庆西邑、弥渡红岩、南涧乐秋云南重楼根茎中均检测到重楼皂苷H,除巍山龙街外其他产地多叶重楼根茎中检测到重楼皂苷Ⅲ,在洱源凤羽、鹤庆西邑多叶重楼根茎中还检测到重楼皂苷Ⅴ。结论 大理不同产地多叶重楼和云南重楼根茎中均检测到重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ和重楼皂苷Ⅶ,多叶重楼和云南重楼根茎HPLC指纹图谱相似度极低,7种主要甾体皂苷成分也存在较大差异,大理不同产地云南重楼根茎中重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ和重楼皂苷Ⅶ的含量高于多叶重楼。
  • 论著
    曾建伟, 张珍丽, 李西海, 吴樟强, 褚剑锋, 张书娟, 谭春江, 毛敬洁, 朱晓勤, 林如辉
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    目的 采用Box-Behnken响应面法优选牛至中百里香酚与香芹酚的提取工艺。方法 在单因素实验的基础上,以百里香酚与香芹酚提取率之和为评价指标,采用Box-Behnken设计法考察乙醇浓度、液固比和药材粒度对提取率的影响。结果 最佳的提取工艺参数为:乙醇浓度体积分数80%,液固比13∶1(mL/g),药材粒度为过40目筛,最高提取率为694.80 μg·g-1,与预测值的偏差较小。结论 所优选的提取方法操作简便、成本低、预测性良好,可为牛至中百里香酚与香芹酚的规模化大生产提供参考。
  • 论著
    徐岩, 翟英南, 段思琪, 李明成, 高丽君, 孙丽媛, 王艳双, 李丹, 刘桐辉
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    目的 本实验对名贵中药材鹿茸的DNA指纹特征进行研究,从分子水平鉴定及分析鹿茸,研发鹿茸DNA检测试剂盒,并对其进行性能评价。方法 以鹿茸细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(CoⅠ)和鹿茸线粒体细胞色素b(cytochrome b, Cyt b)为靶基因,采用生物信息学技术设计5对特异性引物,经实验筛选后确定细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ 1,即mt DNA CoⅠ1(NC_013834.1)为特异性最好的引物,对鹿茸样品通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)进行扩增,优化PCR反应体系及反应条件,研发出鹿茸DNA检测试剂盒。对其性能进行评价,并对市售鹿茸样品进行检测。结果 使用鹿茸DNA检测试剂盒提取的DNA纯度均在1.785~1.906内,该试剂盒的特异性体现在检测正品时出现条带,而伪品无条带;灵敏度达3.125 ng·μL-1;反复冻融5、10、15、20次后仍有效用;重复检测正、伪品3次,结果均一致;-20 ℃保存,有效期可长达1年。对5个地区12个市售样品进行质量分析,合格率为66.67%。结论 研发的鹿茸DNA检测试剂盒特异性强、灵敏度高、稳定性及重复性均良好,操作简单,检测样品微量,适用范围广,成本低廉,结果准确,可为中药鹿茸提供一种科学、准确、可靠的鉴定方法。同时也表明市售鹿茸样品质量良莠不齐,混伪品大量充斥。
  • 论著
    卢紫娟, 王玉龙, 王旭峰, 游蓉丽, 秦文杰, 秦雪梅, 李震宇
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    目的 分析不同干燥方式对款冬花主要化学成分的影响,为确定款冬花最佳干燥方式奠定依据。方法 比较不同干燥方式下款冬花药材的水分、款冬酮含量,对指纹图谱中共有峰的峰面积进行主成分分析和相对含量比较。结果 阴干样本水分含量高于烘干;不同干燥方式对款冬酮含量变化影响不大;主成分分析表明,阴干样本与烘干样本之间存在较大差异,阴干样本中各成分相对含量均为最高,烘干对款冬花中咖啡酰奎宁酸和黄酮类成分影响较大,对倍半萜类成分影响较小。55 ℃烘干对款冬花中主要成分的影响相对较小。结论 阴干可最大程度的保留款冬花成分不受破坏,即款冬花传统的阴干方式是有一定科学依据的。然而,为了便于款冬花规模化产地加工,同时尽量降低烘干对款冬花成分的影响,建议选择55 ℃的烘干温度。
  • 论著
    陈琛, 曾中三, 谢希, 秦旭平, 李洁
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    目的 探讨弱氧化性低密度脂蛋白(minimally modified low density lipoprotein,mmLDL)上调在体小鼠肠系膜动脉ETA受体的作用(endothelin type A receptors,ETA)并考察自噬是否参与这一过程。方法 小鼠尾静脉注射mmLDL,腹腔注射Class Ⅲ PI3K自噬通路抑制剂6-氨基-3-甲基嘌呤(3-methyladenine,3-MA),探究自噬在mmLDL给药处理小鼠中的作用,微血管张力描记仪观察内皮素-1(endothelin-1, ET-1)引起的小鼠肠系膜动脉收缩量效曲线的变化,RT-PCR定量ETA受体mRNA,Western blot检测ETA受体和Class Ⅲ PI3K、Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、p62及p-NF-κB、NF-κB的蛋白水平表达。结果 mmLDL引起ET-1收缩量效曲线明显增强,表现为Emax值由生理盐水(NS)组的(184.87±7.46)%上升为(319.91±20.31)% (P<0.001),pEC50值由NS 组的(8.05±0.05)上升为(9.11±0.09) (P<0.01)。mmLDL在上调Class Ⅲ PI3K、beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ和下调p62蛋白水平的同时,也引起ETA受体mRNA水平、蛋白表达明显增加,增加了p-NF-κB的蛋白水平;腹腔注射3-MA抑制了mmLDL的这些作用。结论 mmLDL能通过Class Ⅲ PI3K/Beclin-1通路激活自噬及下游NF-κB通路上调ETA受体。
  • 论著
    蒋德旗, 杨晓菲, 陈晓思, 骆俞枝, 覃雨薇, 韦梦俏, 樊燕萍
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    目的 研究没食子酸对帕金森病(PD)动物模型的神经保护作用及相关机制。方法 36只小鼠随机分为对照组、1-甲基-4-苯基,1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1, 2, 3, 6-tetrahydropyridine,MPTP)组和没食子酸组,MPTP组和没食子酸组小鼠每天给予30 mg·kg-1 MPTP腹腔注射,连续注射7 d,对照组小鼠同时给予等量生理盐水,没食子酸组小鼠从第1天开始每天给予200 mg·kg-1没食子酸连续灌胃14 d,MPTP组和对照组小鼠均给予等量生理盐水。给药结束后7 d用爬杆实验和悬挂实验分析行为学功能,采用免疫组化检测黑质纹状体酪氨酸羟化酶(TH)表达情况,TUNEL法检测黑质神经细胞凋亡,qRT-PCR分析SIRT3 mRNA水平,Western blot检测蛋白表达情况。结果 与对照组比较,MPTP组小鼠运动协调能力减弱,黑质和纹状体TH表达减少,黑质神经细胞凋亡明显增多,黑质SIRT3 mRNA和蛋白表达水平明显降低、超氧化物歧化酶2(SOD2)蛋白表达减少,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。没食子酸组小鼠经药物干预后,运动协调能力增强,黑质和纹状体TH表达增多、黑质神经细胞凋亡受到抑制,SIRT3 mRNA和蛋白表达水平升高,SOD2蛋白表达上调,与模型组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 没食子酸可改善PD模型小鼠行为学功能障碍,抑制多巴胺能神经元损伤,作用机制可能与其上调SIRT3基因表达有关。
  • 论著
    包雪阳, 郑丹凤, 梅峰, 薛蕊, 王玲, 张宇, 窦骏
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    目的 探究2种治疗肿瘤常用的载药纳米材料,四氧化三铁(iron oxide nanoparticles,IONPs)和普鲁士蓝(prussian blue nanoparticles,PBNPs),对上皮性卵巢癌(epithelia ovarian cancer,EOC)细胞干性的影响,为纳米材料应用于EOC的治疗提供实验依据。方法 分别用IONPs和PBNPs处理SKOV3、HO8910 2种EOC细胞,通过RT-qPCR和Western blot检测耐药基因表达变化;通过细胞增殖和克隆形成实验检测细胞增殖能力变化;运用流式细胞仪检测干性相关表面分子表达量的变化。结果 IONPs和PBNPs在2种细胞株上均可以下调耐药基因ABCG和ALDH1A1在mRNA和蛋白水平上的表达;IONPs在2种细胞株上均使CD44+CD117+亚群的比例降低,而PBNPs在2种细胞株上均使CD44+CD117+亚群的比例升高;IONPs和PBNPs均能显著抑制SKOV3细胞株增殖能力,但IONPs对HO8910细胞株无明显作用。结论 IONPs可以显著降低EOC SKOV3、HO8910 2种细胞株的耐药基因和干细胞亚群,而PBNPs虽然降低了这2种细胞的耐药基因,抑制增殖,但是提高了干细胞亚群,促进癌干细胞的生成。
  • 论著
    李开铃, 李嫄, 赵静, 陈冉, 张景勍
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    目的 研究壳聚糖包衣姜黄素醇质体(chitosan coated curcumin ethosomes,CMETS-CS)的体外释药特性和大鼠体内药动学特性。方法 采用动态透析法考察CMETS-CS在2种介质(pH 1.2 HCl和pH 6.8 PBS溶液)中的体外累积释放率,通过相似因子法评价释药行为;大鼠灌胃给药后,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定各时间点血药浓度,绘制药-时曲线,通过DAS软件处理并计算药动学参数及生物等效性。结果 CMETS-CS在pH 1.2 HCl和pH 6.8 PBS溶液中的累积释放率分别为(70.49±0.75)%和(73.90±0.52)%,与CM相比明显增加体外释药量。此外,CMETS-CS在2种释放介质中的释放行为具有相似性。经计算后,CMETS-CS的0~72 h曲线下面积(AUC0-72 h)、平均滞留时间(MRT0-72 h)、峰浓度(ρmax)分别为游离姜黄素(curcumin,CM)的11.84、5.45和1.55倍,其CMETS-CS的相对生物利用度为1 111.32%。CMETS-CS和CM的AUC0-72 h、AUC0-∞tmax生物不等效,但ρmax生物等效。结论 与CM相比,CMETS-CS可改善体外释药行为,显著提高口服生物利用度,且生物不等效。
  • 论著
    闫振宇, 王新伟, 买春阳, 苏博, 张子杰, 韩柯
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    目的 制备共载吲哚美辛(IND)和多柔比星(DOX)的还原响应型胶束(HID-NPs),并探究其逆转乳腺癌MCF-7/ADR细胞多药耐药效果。方法 通过酰胺化反应制备基于透明质酸的两亲性物质(HA-SS-PA),用核磁共振氢谱(1H-NMR)对其结构进行确证;采用纳米共沉淀法制备包载IND和DOX的胶束(HID-NPs)。分别采用动态光扫描(DLS)和透射电镜(TEM)对HID-NPs进行了粒径测定和形貌观察;采用透析法测定了HID-NPs响应释药行为;采用激光共聚焦观察了人乳腺癌DOX耐药细胞MCF-7/ADR细胞对HID-NPs的摄取情况;并通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法测定了HID-NPs对人乳腺癌MCF-7和MCF-7/ADR细胞的细胞毒性。结果 核磁共振氢谱表明,HA-SS-PA已成功制备;DLS和TEM结果显示,HID-NPs呈圆形,分布均匀,平均粒径为(103±3.2)nm。释药结果表明,HID-NPs具有良好的还原响应性。细胞摄取实验证明,与游离DOX相比,HID-NPs显著增加DOX在MCF-7/ADR细胞内蓄积量;MTT实验表明,HID-NPs能显著杀死MCF-7/ADR细胞。结论 HID-NPs表现出良好的还原响应性和明显的逆转DOX耐药效果,可用于肿瘤多药耐药的治疗。
  • 论著
    林洁虹, 陈钢, 邵泓, 汪泓, 林梅
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    目的 结合氘代盐酸水解和柱前衍生化,建立超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)同时测定胸腺法新原料药中9种痕量D-氨基酸含量的方法。方法 采用氘代盐酸水解,选择Nα-(2,4-二硝基-5-氟苯基)-L-丙氨酰胺[Nα-(2,4-dinitro-5-fluorophenyl)-L-alaninamide,FDAA]进行柱前衍生化;选择ACCQ-TAGTM ULTRA C18色谱柱 (2.1 mm×100 mm,1.7 μm),以0.1%(V/V)甲酸/水溶液-乙腈为流动相,流速为0.3 mL·min-1,线性梯度洗脱;Xevo G2-S Q-TOF采用电喷雾离子(ESI)源和正离子监测模式,通过标准曲线法对胸腺法新原料药中9种D-氨基酸含量进行准确测定。结果 9种D-氨基酸衍生产物在一定范围内进样量与峰响应值呈良好的线性关系(r>0.991 2);定量限低至0.05~0.30 pmol;精密度和平均加标回收率等均符合2015年版《中国药典》方法学要求。5家企业的胸腺法新原料药中D-氨基酸含量测定结果为25.16~1 322.01 μg·g-1,其中D-Glu、D-Asp、D-Lys和D-Ser的含量较高,分别为1 105.45~1 322.01、614.15~740.50、358.06~388.76和138.78~291.60 μg·g-1结论 所建立的方法灵敏、高效、可靠,可同时测定胸腺法新中9种痕量D-氨基酸的含量,为该合成多肽药物全面控制消旋肽杂质提供新的方法参考。
  • 论著
    王丽君, 回音, 王珏, 殷果, 江坤, 黄洋, 王铁杰
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    目的 建立中药皂角刺中山皂角刺和野皂角刺掺伪的快速分析鉴别方法。方法 利用近红外光谱法结合线性判别分析(LDA)、支持向量级(SVM)和人工神经网络法(BP-NN),建立中药皂角刺中山皂角刺和野皂角刺掺伪的快速无损鉴别模式识别模型;采用偏最小二乘(PLS)回归分析建立掺伪品中山皂角刺和野皂角刺伪品的掺伪量预测模型。结果 对于皂角刺正品和其山皂角刺掺伪及野皂角刺掺伪品SVM法分类效果优于LDA和BP-NN法。谱段选择5 000~4 200 cm-1、采用平滑-归一化法预处理数据方法时,SVM建模训练集、验证集和测试集分类准确率分别为100%、100%和96.4%。PLS回归模型结果显示,山皂角刺掺伪预测集rp、预测集均方根误(RMSEP)和偏差(bias)值分别为0.993、2.91%和-0.330 3;野皂角刺掺伪预测集rp、RMSE和bias值分别为0.995、2.57%和0.364 9。结论 本实验建立的模式识别模型及回归方法能够准确快速判别皂角刺及山皂角刺和野皂角刺掺伪品并能较准确预测正品中山皂角刺和野皂角刺掺伪量。
  • 论著
    焦亿, 宋永熙, 张婧, 周俊洪, 海鑫
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    目的 探讨品管圈管理在提高住院麻醉药品处方合格率的应用效果。方法 组建品管圈,利用80/20法则和鱼骨图探讨我院住院麻醉药品处方不合格的原因,确定提高处方合格率的对策,通过对策的实施与检讨,比较品管圈管理前后的处方合格率变化。结果 利用品管圈管理,2018年我院住院麻醉药品处方质量显著提高,合格率由2017年的70.07%提高到2018年97.78%,高于目标值6.69%。持续品管圈管理后,2019年前三季度处方合格率提高到99.33%。结论 品管圈活动的开展能够有效地提升住院麻醉药品处方的合格率,既规范了麻醉药品的使用、促进患者用药安全,又提高了药师综合素养和医院药学服务的质量。
  • 论著
    唐彦, 张学杰, 刘鑫, 梅丹, 付强, 李建涛, 张谦, 张鹏霄, 左玮, 张波
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    目的 通过分析我国与国外发达国家罕见病用药保障体系的进展,探索我国罕见病用药医疗保障体系发展的建议。方法 通过文献检索,汇总分析国内外罕见病用药相关政策法规、研发政策和罕见病患者医疗保障政策。结果 经过分析发现,发达国家在罕见病的定义、法规、药物研发激励方面均起步较早,并取得了较好发展,同时具有比较健全的罕见病医疗保障体系。目前我国尚未建立完善的罕见病政策法规和医疗保障体系,也没有罕见病的官方定义。但是,近年来我国关于罕见病用药相关研发审批以及医疗保障等政策正日臻完善。结论 我国虽然尚未建立完备的罕见病政策体系,但也在根据我国具体国情制定一系列的相应政策,缩小了与发达国家之间的差距。我国应在借鉴国外经验的同时,考虑到我国的实际情况,进一步完善罕见病医疗保障相关政策,保障罕见病患者的诊疗。
  • 论著
    杨珺, 于波, 黄红兵, 翟青, 李焕, 杜琼, 刘澍, 戴媛媛, 贺飞, 樊英, 王晨, 董梅, 刘江, 刘玉国, 徐珽, 黄萍, 张文周, 蒋刚, 曹俊岭, 王丽霞, 戴助, 孙言才, 姜明燕, 吕永宁, 卢晓阳, 刘茂柏, 梁宁生, 宋燕青, 李朋梅, 刘广宣, 郝志英, 姚敦武, 李桂茹, 孔树佳, 谢瑞祥, 王建华, 魏青, 贾乐川, 李玫, 孟珺, 曹舫, 陈寒杰, 鄢丹, 白在先, 李国辉, 赫捷
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  • 论著
    朱珠, 张波, 唐彦, 梅丹, 李大魁
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    扼要介绍药学专家孟目的的职业生涯。他曾在北京协和医院药房工作,经历了医疗业务量和制剂供应的快速发展时期,两度担任代理药房主任;在新中国成立前后四部药典的编纂中,他一直处于骨干地位,在我国剂型和药名的规范命名和统一翻译规则方面,功不可没。