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• 2015年, 50卷, 第18期
  刊出日期：2015-09-25

    

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综 述
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  综 述

  药用植物内生真菌多样性研究进展

  谭小明,周雅琴,陈娟,郭顺星

  2015, 50(18): 1563-1580. https://doi.org/10.11669/cpj.2015.18.001

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  总结近年来国内外药用植物内生真菌多样性研究的最新文献,分析药用被子植物(木本和草本)、裸子植物和蕨类植物等内生真菌的种类多样性,及其作用多样性和与寄主专一性关系。综述了药用植物内真菌的分离方法、鉴定方法、种类多样性、作用多样性及其与寄主专一性的关系,分析了这一领域研究目前存在的问题,并提出了可能的解决方法。药用植物内生真菌具有丰富的种类多样性,其在药用植物资源的保护与资源再生中具有巨大的应用潜力,还有待进行更为系统的研究。
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  灯盏乙素乙酯原料药中主成分含量测定及其有关物质研究

  徐雪林,赵洁,易红,谢小珂,刘晓谦,高慧敏,王智民

  2015, 50(18): 1581-1588. https://doi.org/10.11669/cpj.2015.18.002

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  目的 建立同时测定灯盏乙素乙酯原料药主成分及其有关物质含量的反向高效液相色谱法,并采用UPLC-MS对灯盏乙素乙酯的主要有关物质进行结构鉴定。方法 采用Kromasil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)对主成分及其有关物质进行含量测定,柱温25 ℃,以甲醇-0.2%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mLmin^-1,检测波长为335 nm;采用高分辨液质联用仪对其主要有关物质进行结构鉴定。结果 灯盏乙素乙酯与有关物质及其降解产物的分离度良好;灯盏乙素乙酯质量浓度在5.005~1 001 mgL^-1内与峰面积呈良好线性关系,r²=0.999 9,平均回收率为99.6%;灯盏乙素乙酯原料药中的主要有关物质为灯盏乙素,含量为0.89%,杂质总量为1.14%。结论 该方法操作简便、快速、准确、灵敏度高,可用于灯盏乙素乙酯原料药的含量测定及有关物质的检查。
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  人参皂苷Re对球囊损伤所致大鼠颈动脉新生内膜增生及ERK通路的影响

  高杨,杨洁,安勇刚,邓江,杨丹莉,黄燮南

  2015, 50(18): 1589-1593. https://doi.org/10.11669/cpj.2015.18.003

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  目的 探讨人参皂苷Re (ginsenoside Re) 对球囊损伤所致血管新生内膜增生的作用及其分子机制。方法 利用雄性SD大鼠建立球囊损伤致颈动脉内膜增生模型,模型制备完成后后将40只大鼠随机分为5组:人参皂苷 Re 6、12、24 mgkg^-1d^-1剂量组、模型组及假手术组,每组8只,术后次日腹腔注射给药,模型组与假手术组给予等体积生理盐水,连续给药14 d后取损伤侧颈动脉行HE染色,观察颈动脉血管腔狭窄程度并计算新生内膜面积及内膜/中膜面积的比值;实时荧光定量聚合酶链反应法检测血管壁丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(mitogen-activated protein kinase phosphatase-1,MKP-1)mRNA的表达;免疫组织化学法检测血管壁丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(phosphorylation extracellular signal-regulated kinase,pERK1/2)蛋白质的表达。结果 与假手术组比较,模型组血管腔明显狭窄 (P<0.01),血管壁磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白质表达明显上调,而丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1 mRNA及蛋白质表达却明显下调;人参皂苷Re各给药组均能改善球囊损伤所致的血管狭窄,使血管壁新生内膜面积、新生内膜/中膜面积的比值明显减小(P<0.05),并逆转球囊损伤后磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白质表达(P<0.05)和丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1 mRNA及蛋白质表达(P<0.05,P<0.01)。结论 人参皂苷Re可抑制球囊损伤所致的颈动脉狭窄,其分子机制与抑制ERK通路有关。
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  Dickkopf (DKK1) 对人白血病细胞凋亡的调控机制研究

  赵宁, 张嘉美, 吴晓玲, 刘晓明, 邓光存

  2015, 50(18): 1594-1599. https://doi.org/10.11669/cpj.2015.18.004

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  目的 探讨Dickkopf (DKK1)对人类白血病细胞株U937细胞的凋亡调控机制。方法 用DCFH-DA荧光探针法检测活性氧(ROS)水平 ;用 JC-1染色法检测线粒体跨膜电位(ΔΧ m)水平;Annex in V/PI双标法检测凋亡率;Western-blot检测凋亡相关蛋白水平。结果 Dickkopf (DKK1)处理后的人白血病细胞活性氧水平显著升高且NAC可以阻断DKK1对活性氧水平的升高;线粒体膜电位水平显著下降;并且上调了促凋亡蛋白BAX的表达,下调了抗凋亡蛋白Mcl-1、Bcl-2的蛋白表达水平。结论 Dickkopf (DKK1)通过升高活性氧水平并降低线粒体膜电位水平从而诱导人白血病细胞的凋亡。
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  重楼活性单体(PP-22)对人胃癌MGC803细胞增殖和凋亡的影响

  宫瑞松,肖晓慧,刘志龙,陈家劲,刘纪明,蒋建伟

  2015, 50(18): 1600-1606. https://doi.org/10.11669/cpj.2015.18.006

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  目的 探讨重楼活性单体PP-22对人胃癌MGC803细胞增殖和凋亡的影响及联合氟尿嘧啶或洛铂的抗癌效应。方法 采用噻唑蓝(MTT)法和克隆形成抑制实验观察不同浓度的重楼单体PP-22对人胃癌MGC803细胞增殖抑制作用;采用PP-22分别联合氟尿嘧啶或洛铂,观察对人胃癌MGC803细胞增殖抑制作用;碘化丙啶(PI)单染及 AnnexinV-FITC／PI双染流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡水平;Western blotting检测PP-22对细胞凋亡相关蛋白的表达。结果 与正常肝L02细胞相比,重楼单体PP-22能显著抑制MGC803细胞的生长,作用呈剂量-效应关系;随着PP-22浓度的增加,细胞克隆形成逐渐减少,与细胞对照组相比有显著差异;PP-22与不同浓度的化疗药物( 氟尿嘧啶,洛铂) 联合作用于MGC803细胞48 h,可提高MGC803细胞对这些化疗药物的敏感性;不同浓度PP-22作用后,细胞阻滞于S期;存在Caspase-3 和Caspase-9蛋白的活化和降解,抗凋亡蛋白Bcl-2减少,细胞促凋亡蛋白Bak的表达增加。结论 PP-22通过诱导人胃癌MGC803细胞凋亡抑制细胞增殖,并提高MGC803细胞对氟尿嘧啶,洛铂的敏感性。
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  论 著

  槐耳浸膏联合化疗药物对人胃癌MGC803的体外抑制作用

  周玲,乐涵波

  2015, 50(18): 1607-1612. https://doi.org/10.11669/cpj.2015.18.007

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  目的 筛选出槐耳浸膏与化疗药物的最佳组合并探讨槐耳浸膏和化疗药物5-氟尿嘧啶诱导人胃癌MGC803细胞凋亡的机制。方法 以不同浓度槐耳浸膏和化疗药物(5-氟尿嘧啶,紫杉醇)作用于体外培养的人胃癌细胞MGC803,通过 MTT 法检测槐耳浸膏对MGC803细胞增殖的作用,倒置显微镜观察其形态的变化;将0.2 mgmL^-1的槐耳浸膏分别与5-FU(2.5 μgmL^-1)或紫杉醇(0.5 μgmL^-1)联合处理细胞,比较存活率。流式细胞术检测0.2 mgmL^-1槐耳浸膏联合5-FU(2.5 μgmL^-1)干预MGC803细胞24、48 h后细胞的凋亡情况;Western Blot法检测0.2 mgmL^-1槐耳浸膏联合5-FU(2.5 μgmL^-1)干预MGC803细胞24、48 h后细胞的P53、T-Akt和P-Akt蛋白的表达。结果 槐耳浸膏及化疗药物(5-氟尿嘧啶,紫杉醇)均能降低MGC803细胞存活率,并呈时间和剂量依赖性;倒置显微镜下可见细胞胞体缩小、核碎裂,且呈浓度与时间依赖性(P<0.01)。相较于单独应用化疗药物,联合用药能够显著降低细胞的生存率。槐耳浸膏联合5-FU联合给药上调人胃癌细胞MGC803 T-Akt及P53蛋白表达量,同时下调P-Akt的表达量。结论 槐耳浸膏联合5-FU在体外诱导胃癌细胞MGC803凋亡作用可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路来实现的。联合使用槐耳浸膏和化疗药物可能会更有效发挥槐耳抗肿瘤增殖的作用。
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  论 著

  和厚朴酚与siRNA共递送的阳离子脂质体研究

  裴希为,冯强,王坚成

  2015, 50(18): 1613-1618. https://doi.org/10.11669/cpj.2015.18.009

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  目的 利用聚乙二醇(PEG)修饰的阳离子脂质体实现和厚朴酚与siRNA的共递送以改善肿瘤治疗效应。 方法 利用薄膜分散法制备聚乙二醇修饰的阳离子脂质体,通过疏水作用包载和厚朴酚以及静电吸附作用包载siRNA的方式,构建共递送和厚朴酚与siRNA的阳离子脂质体。通过粒径、电位、包封率、血清稳定性等方法考察脂质体的制剂学性质,并考察了制剂的细胞摄取与胞内分布、溶酶体逃逸能力以及肿瘤细胞生长抑制效应。结果 所制备的各组载和厚朴酚脂质体的平均粒径均在100 nm以内,均具有较高的药物包封率。优选的共递送脂质体制剂(N/P=5)具有较好的血液稳定性,可获得较高的细胞摄取和较好的胞内溶酶体逃逸能力;和厚朴酚与siRNA的协同效应具有较好的抑制肿瘤细胞生长效果。结论 采用聚乙二醇修饰的阳离子脂质体可以实现和厚朴酚和siRNA的共递送并将可能有利于体内肿瘤治疗。
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  论 著

  依替米星骨水泥植入剂在兔体内的局部组织释放及肾脏安全性考察

  毛璐,邢颖,卞婧,丁宜,张伯松,张威,甄健存

  2015, 50(18): 1619-1623. https://doi.org/10.11669/cpj.2015.18.010

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  目的 研究依替米星骨水泥植入剂在家兔体内的局部释放及其全身浓度并评价其肾毒性。方法 将自制定量的依替米星骨水泥药柱,手术植入兔股骨髓腔,测定植入依替米星骨水泥后不同时间的骨及周围组织浓度和全身血药浓度,应用Phoenix WinNonlin 6.3软件进行药物动力学参数计算。应用全自动生化分析仪对给药前后兔的血肌酐和尿素氮进行测定,评价其肾毒性。结果 依替米星骨水泥植入剂,t_1/2 (13.2±4.71) h,t_max (4.44±0.88) h,ρ_max (7 163.15±1 673.62) ngmL^-1,术后1,2,4周骨髓局部浓度分别为(226.14±60.20),(16.00±11.40),(5.98±1.97) μgg^-1 ,骨皮质浓度(54.68±36.98), (3.95±1.73), (1.39±0.77) μgg^-1。结论 依替米星骨水泥植入剂较全身注射给药可以达到较好的缓释作用。植入1个月后局部组织浓度仍能达到多数细菌MIC以上,而且肾毒性较全身用药低,可以为临床使用提供参考。
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  论 著

  缬沙坦胶囊有关物质的检测分析

  刘朝霞,程奇蕾,何兰

  2015, 50(18): 1624-1629. https://doi.org/10.11669/cpj.2015.18.011

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  目的 评价缬沙坦胶囊的有关物质现状及存在的问题。方法 采用现行标准结合探索性研究对8个厂家的175批样品进行考察,并对结果进行分析。结果 采用法定标准检验,174批样品有关物质均符合规定,1批不符合规定,不合格样品检出一个含量为1.0%的未知杂质,杂质总量为1.1%,超出了规定限度(标准规定:单个杂质不得过0.2%,杂质总量不得过0.7%);探索性研究表明,该未知杂质仅在2个厂家的制剂中检出,原料药中未检出该杂质,提示该杂质非工艺杂质,系制剂产生的降解产物;采用LC-MS/MS技术分析推断该杂质结构,结合制剂工艺,明确其产生途径。结论 国产缬沙坦胶囊及原料药有关物质控制基本能符合现行标准要求,达到了与原研相当的水平;分析不合格样品超限度杂质的产生原因,反映出个别厂家在制剂工艺的选择及关键质控点的控制上有待改进,以保证产品的稳定性。
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  药典之页

  常用中药饮片两头尖和桑寄生中微生物污染的检测及分析

  谢文明,张敏,潘建文

  2015, 50(18): 1630-1633. https://doi.org/10.11669/cpj.2015.18.012

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  目的 考察中药饮片两头尖和桑寄生中微生物污染状况,为中药饮片微生物限度标准的制定提供参考。方法 按《中国药典》2015年版非无菌药品微生物限度标准(公示稿)对两头尖和桑寄生进行微生物污染检测,并按中国食品药品检定研究院下发的课题方案补充了耐热菌及其他控制菌的检测。结果 对2个品种共23批样品检测发现微生物污染较为严重。结论 中药饮片中微生物污染亟须进行控制,以提升我国中药饮片及中药制剂的质量。
药物与临床
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  药物与临床

  北京地区2008~2014年膦甲酸钠不良反应分析

  胡扬,刘一,刘水,张波,梅丹,朱兰

  2015, 50(18): 1634-1638. https://doi.org/10.11669/cpj.2015.18.013

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  目的 统计分析北京地区近6年来膦甲酸钠的不良反应报告,为膦甲酸钠的安全合理应用提供依据。方法 收集2008年3月~2014年12月北京市药品不良反应监测中心数据库中膦甲酸钠不良反应报告,并对152例不良反应统计分析ADR报告类型、ADR发生时间、患者年龄、性别和民族分布、严重不良反应、过敏史、给药途径、剂型、用量、用药原因、患者既往ADR史、ADR累及器官/系统及表现、ADR关联性评价结果、ADR处理及预后。结果 膦甲酸钠致ADR在31~60岁发生率较高,55.3%的ADR发生于用药后24 h内,临床表现复杂多样,涉及机体多个器官或系统,主要和严重的不良反应为肾损害及癫痫发作。结论 膦甲酸钠的安全性是临床应关注的问题,应在合理使用的基础上,监测并及时处理其不良反应。
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  国际肺动脉高压治疗药物偿付政策及对我国的启示

  关轶茹,相维,张方

  2015, 50(18): 1639-1642. https://doi.org/10.11669/cpj.2015.18.014

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  目的 介绍国际肺动脉高压治疗药物偿付政策,并为我国相关政策的探索提供参考。方法 根据文献分析澳大利亚、加拿大、美国以及部分欧盟国家肺动脉高压治疗药物的报销情况以及偿付机制,并与国内现状进行比较。结果 肺动脉高压治疗药物虽然价格昂贵,但本研究包含的国家中,大多数都对其进行报销;而我国目前只有个别城市将肺动脉高压治疗药物纳入医保,在全国范围内,该类药物可及性极差,患者面临因病致贫甚至放弃治疗的窘境。结论 我国应当借鉴国际罕见病立法较早、医疗保障制度完善的国家的经验,同时剖析国内较早尝试肺动脉高压政府救助的地区的做法,推进肺动脉高压治疗药物报销。
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  我国网上药店规范经营存在的问题及监管对策

  陈晶, 蒋奎, 刘妍

  2015, 50(18): 1643-1647. https://doi.org/10.11669/cpj.2015.18.015

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  目的 为政府监管网上药店提供对策参考,促进我国网上药店发展。方法 采用网上调查和文献研究方法,分析我国网上药店规范经营存在的问题。结果 不具备经营资格的网上药店依然存在;网上药店执业药师资格无法辨别;网上药店网页设置规范缺乏具体标准;是否具备网上药店经营资格的鉴别比较困难。结论 建立和完善相关法律法规;建立有效易行的网上药店相关验证体系;提供网上药店网页设置规范模板;将各种名称与证书编码对应;建立网上药店执业药师共享平台;加大对网上药店违法违规经营的惩罚力度;加大对消费者的宣传力度。
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  药事管理

  基于某院2012~2014年度中药注射剂临床应用情况探讨中药注射剂的合理应用和监管

  刘治军,陈頔,谭玲

  2015, 50(18): 1648-1652. https://doi.org/10.11669/cpj.2015.18.017

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  目的 结合我院中药注射剂使用情况和文献报道,探讨临床如何合理使用高风险中药注射剂。方法 统计分析我院2012~2014年度门急诊和病房各科室中药注射剂的处方/医嘱使用率、处方金额占比等,结合文献检索,了解中药注射剂的使用现状并分析存在的问题。结果 我院门急诊中药注射剂处方率呈逐年上升趋势,2012~2014年分别为1.19%、1.34%和1.40%;急诊、耳鼻喉和神经内科处方率和处方金额占比都稳居三甲。病房中药注射剂医嘱使用率稳定,2012~2014年分别为0.79%、0.80%和0.79%,其中肿瘤内科(20%~26%)、急诊科(12%~14%)和神经内科(10%~11%)的使用率最高,而中医科仅占4%~5%。2012~2014年中药注射剂的总金额占全院总药费金额的百分比分别为2.10%、2.07%和2.14%。我院使用强度低于文献报道。结论 我院中药注射剂使用不尽合理,突出表现在非中医科室使用了绝大多数的中药注射剂。建议临床以“中医会诊制度”来支撑中药注射剂的合理应用,需要国家药监部门强化说明书管理,提高药品质量标准,共同呵护中药注射剂这个中药的创新产品。